بیان ترشحی بخش کروی هماگلوتینین (ha۱) ویروس آنفولانزای h۵n۱) a) در باسیلوس سوبتیلیس

زمینه و اهداف: ویروس h5n1  ممکن است قابلیت انتقال بین انسان ها را بدست آورد. بنابراین امکان وقوع یک بیماری همه گیر وجود دارد. پروتئین ha1  نقش اصلی را در اتصال ویروس به سلول هدف بازی می کند و پاسخ های آنتی بادی خنثی کننده عمدتاً علیه این ناحیه است. باسیلوس سوبتیلیس میزبانی بدون اندوتوکسین جهت بیان وترشح پروتئین های هترولوگ واجد فعالیت ایمونولوژیک شناخته شده است. اگر چه این باکتری قادر به تولید پروتئین های گلیکوزیله نیست اما تحقیقات نشان داده است که گلیکوزیلاسیون ha برای ایمنی زایی آن چندان ضروری نمی باشد. در این مطالعه پروتئین نوترکیب ha1  در باسیلوس سوبتیلیس به صورت ترشحی تولید شد. مواد و روش کار: توالی ha1 در وکتور  (–)  pgem® 5zfکلون شد. سپس این توالی در شاتل وکتور pht43 ساب کلون وجهت تکثیر به اشریشیاکلی منتقل گردید.پلاسمید نوترکیب استخراج شده از اشریشیاکلی به منظور ترانسفورم باسیلوس سوبتیلیس با روش الکتروپوریشن مورد استفاده قرار گرفت. پس از القای باسیلوس سوبتیلیس نوترکیب با iptg، کل پروتئین­های سلول و پروتئین ترشح شده درون محیط کشت طی یک بازه زمانی، با استفاده از sds-page بررسی شد. یافته ها: صحت ساختار ha1-pht43 با تعیین توالی و هضم آنزیمی تایید شد. نتایج sds-page  نشان داد که پروتئین نوترکیبha1  با موفقیت بیان و درون محیط کشت ترشح شده است.                                                      نتیجه گیری:  باسیلوس سوبتیلیس میزبانی بدون اندوتوکسین است که می تواند به عنوان یک بستر پروکاریوتی مناسب جهت تولید پروتئین نوترکیب ha1  مورد استفاده قرار گیرد. پروتئین تولید شده در این پژوهش می تواند به عنوان کاندیدی برای واکسن مورد توجه قرار گیرد و لازم است توان ایمنی زایی آن در کنار مدل های حیوانی همراه با گروه های کنترل مناسب ارزیابی شود.